Il numero di giocatori minimo per prendere parte ad Assassino è 5, ma è consigliabile essere almeno in 7 o in 8 per divertirsi di più. Una volta che il numero dei partecipanti è definito, il mazziere distribuisce a ognuno una carta, che rimane coperta. Chi ha ricevuto il Re di Denari (si gioca, infatti, con le carte napoletane) deve scoprire la propria carta dato che è il Commissario. Chi fra i partecipanti, invece, ha ricevuto l'Asso di Spade, è l'Assassino e non deve assolutamente scoprire la propria carta. Gli altri partecipanti sono soltanto dei civili che 'osservano' e prendono parte alla divertente sfida tra il Commissario e l'Assassino, in un susseguirsi di omicidi.